北京吉瑞森(sen)科技(ji)有(you)限(xian)責(ze)任公司&南(nan)通海箬化學有(you)限(xian)公司

    DOWEX系(xi)列(lie)離(li)子(zi)交(jiao)(jiao)換(huan)(huan)(huan)色(se)譜分離(li)樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)有強酸性陽離(li)子(zi)交(jiao)(jiao)換(huan)(huan)(huan)樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)和強堿性陰(yin)離(li)子(zi)交(jiao)(jiao)換(huan)(huan)(huan)樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)兩大類，每一(yi)(yi)類又根據交(jiao)(jiao)聯(lian)度（即(ji)DVB%）的不同劃分為3個小類，分別(bie)以“×2”、 “×4”與“×8”表示，在此(ci)基礎(chu)上(shang)進一(yi)(yi)步提(ti)供3個粒度范圍可(ke)(ke)供選擇(ze)，即(ji)150-300μm（50-100目(mu)）、75-150μm（100-200目(mu)）以及35-75μm（200-400目(mu)），共(gong)計18個樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)牌號(hao)(hao)。此(ci)外，Dow化學公(gong)司又提(ti)供了一(yi)(yi)個雙功能基離(li)子(zi)交(jiao)(jiao)換(huan)(huan)(huan)色(se)譜分離(li)樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)——DOWEX Retardion 11A8 50 - 100 mesh（含弱酸基團與強堿基團），因(yin)此(ci)，本系(xi)列(lie)產品共(gong)有19個牌號(hao)(hao)的樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)可(ke)(ke)供客(ke)(ke)戶選擇(ze)。顯然，不同交(jiao)(jiao)聯(lian)度的樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)含水(shui)量不一(yi)(yi)，體積交(jiao)(jiao)換(huan)(huan)(huan)量、物質(zhi)擴(kuo)散的阻力各異(yi)，如此(ci)寬泛的產品范圍豐(feng)富(fu)了客(ke)(ke)戶的試(shi)用選擇(ze)，可(ke)(ke)以針對具體的應用優選出適宜的色(se)譜分離(li)樹(shu)(shu)(shu)脂(zhi)(zhi)。

   DOWEX樹脂-離子交換色譜填料系(xi)列(lie)離子交(jiao)換(huan)色譜分離樹(shu)(shu)脂(zhi)的(de)(de)(de)骨架材料均為苯(ben)乙烯——二乙烯苯(ben)，采用特殊(shu)的(de)(de)(de)懸浮聚(ju)合工(gong)(gong)藝大規模(mo)制備(bei)而得(de)，具有良(liang)好的(de)(de)(de)化學、物理穩定(ding)性(xing)。易裝柱(zhu)，目標組份擴散(san)阻力小，產品質(zhi)量穩定(ding)。因(yin)此，DOWEX系(xi)列(lie)離子交(jiao)換(huan)色譜分離樹(shu)(shu)脂(zhi)不(bu)僅可以滿足實驗室食品、藥(yao)品等精(jing)細化工(gong)(gong)產品的(de)(de)(de)小試工(gong)(gong)藝開發(fa)，也(ye)使得(de)工(gong)(gong)藝的(de)(de)(de)放大更(geng)為輕松(song)。

樹脂牌(pai)號 酸堿性 粒(li)度范圍 

μm 出廠(chang)離子(zi)形態 含水(shui)量 

% 體(ti)積交換量(liang) 

eq/L

DOWEX 50W×2 強酸性 150-300 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強酸性 75-150 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強酸性 35-75 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×4 強酸性(xing) 150-300 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強酸性 75-150 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強酸性 35-75 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×8 強酸性(xing) 150-300 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強酸性 75-150 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強酸(suan)性 35-75 H+ 74-82 1.7

DOWEX 1×2 強堿性 150-300 Cl- 65-75 0.7

DOWEX 1×2 強堿性 75-150 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×2 強堿性 35-75 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×4 強堿性 150-300 Cl- >50 1.0

DOWEX 1×4 強堿性 75-150 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×4 強堿性 35-75 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×8 強堿性(xing) 150-300 Cl- 43-48 1.2

DOWEX 1×8 強堿性 75-150 Cl- 39-45 1.2

DOWEX 1×8 強(qiang)堿性(xing) 35-75 Cl- 39-45 1.2

DOWEX Retardion 11A8 50-100mesh 弱(ruo)酸、強(qiang)堿(jian)性 150-300 -COOH –N(CH3)3 43-48 1.1

1.2

離子(zi)交(jiao)換層析法分(fen)離氨基酸

DOWEX樹脂-離子交換色譜填料實驗原理

離子(zi)交換(huan)層析(xi)法主(zhu)要(yao)是根據(ju)物質的(de)(de)(de)(de)解離性質的(de)(de)(de)(de)差異(yi)而選(xuan)用(yong)不同(tong)的(de)(de)(de)(de)離子(zi)交換(huan)劑進行分(fen)離的(de)(de)(de)(de)方(fang)法。各(ge)種氨基(ji)酸分(fen)子(zi)的(de)(de)(de)(de)結構不同(tong)，在(zai)同(tong)一pH時(shi)與離子(zi)交換(huan)樹脂的(de)(de)(de)(de)親和(he)(he)力有差異(yi)，因此可(ke)依據(ju)親和(he)(he)力從小(xiao)到大的(de)(de)(de)(de)順序被洗脫(tuo)液洗脫(tuo)下來(lai)，達到分(fen)離的(de)(de)(de)(de)效果。

試劑 和器材

一、 試劑 與材料

苯乙烯磺酸(suan)鈉型樹脂(zhi)（強酸(suan)1×8，100—200目）；2mol/L鹽(yan)酸(suan)溶液；2mol/L氫氧化鈉溶液。

標準氨(an)基酸(suan)(suan)溶液：天(tian)冬(dong)氨(an)酸(suan)(suan)、賴氨(an)酸(suan)(suan)和組(zu)氨(an)酸(suan)(suan)均(jun)配制成2mg/mL的0.1mol/L的鹽酸(suan)(suan)溶液。

混合氨基酸溶液(ye)：將3種(zhong)標準氨基酸溶液(ye)按1∶2.5∶10的比例混合。

檸檬(meng)酸(suan)(suan)-氫(qing)氧化(hua)(hua)鈉(na)(na)-鹽酸(suan)(suan)緩沖液（pH5.8，鈉(na)(na)離子濃度0.45mol/L）：取檸檬(meng)酸(suan)(suan)（C6O7H8?H2O）14.25g，氫(qing)氧化(hua)(hua)鈉(na)(na)9.30g和濃鹽酸(suan)(suan)5.25mL溶于少量水后，定容至(zhi)500mL，冰箱(xiang)保(bao)存。

顯色劑(ji)：2g的水合茚(yin)三酮溶于75mL乙二醇單甲醚中，加水至100mL。

二、器材

20cm×1cm層析(xi)管; 恒壓洗脫瓶; 部分收集器; 分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計。

操作方法

一、樹脂的處理

將干的(de)強酸(suan)型樹脂用蒸餾水浸泡(pao)過(guo)夜，使之充分(fen)溶脹。用4倍體積的(de)2mol/L的(de)鹽酸(suan)浸泡(pao)1小時，傾(qing)去清液(ye)，洗(xi)至中性。再用2mol/L的(de)氫氧化鈉處理，做法同上。后(hou)用欲(yu)使用的(de)緩沖液(ye)浸泡(pao)。

二、裝柱

取(qu)直徑1cm,長度10－12cm的(de)層析柱(zhu)。將柱(zhu)垂直至(zhi)于鐵架上。自頂部注(zhu)入上述經(jing)處理的(de)樹(shu)脂(zhi)懸浮液，關(guan)閉層析柱(zhu)出口，待樹(shu)脂(zhi)沉(chen)(chen)降后，放出過量溶(rong)液，再加入一些樹(shu)脂(zhi)，至(zhi)樹(shu)脂(zhi)沉(chen)(chen)降至(zhi)8 ~ 10cm的(de)高度即(ji)可。

三、氨基酸的洗脫

用(yong)pH5.8的檸檬(meng)酸(suan)緩(huan)沖液沖洗(xi)(xi)平衡交換柱(zhu)(zhu)。調節流速為0.5mL/min，流出液達到(dao)床體(ti)積的4倍時(shi)即可上樣。由柱(zhu)(zhu)上端(duan)仔細(xi)加入(ru)氨基酸(suan)的混合(he)液0.25—0.5mL，同時(shi)開始(shi)收(shou)集(ji)流出液。當樣品液彎(wan)月(yue)面靠近(jin)樹(shu)脂(zhi)(zhi)頂端(duan)時(shi)，即刻加入(ru)0.5mL檸檬(meng)酸(suan)緩(huan)沖液沖洗(xi)(xi)加樣品處(chu)。待(dai)緩(huan)沖液彎(wan)月(yue)面靠近(jin)樹(shu)脂(zhi)(zhi)頂端(duan)時(shi)，再加入(ru)0.5mL緩(huan)沖液。如此(ci)重復兩次，然后用(yong)滴管(guan)小心注(zhu)入(ru)檸檬(meng)酸(suan)緩(huan)沖液（切(qie)勿攪動床面），并(bing)將柱(zhu)(zhu)與(yu)洗(xi)(xi)脫瓶和部(bu)分收(shou)集(ji)器相連(lian)。開始(shi)用(yong) 試管(guan) 收(shou)集(ji)洗(xi)(xi)脫液，每(mei)管(guan)收(shou)集(ji)1mL，共(gong)收(shou)集(ji)60—80管(guan)。

四、氨基酸的鑒定

向各(ge)管收集(ji)液(ye)中加1mL水合(he)茚(yin)三(san)酮(tong)顯(xian)色(se)劑并混(hun)勻，在(zai)沸 水浴 中準確(que)加熱15min后(hou)冷卻(que)至(zhi)室(shi)溫，再加入(ru)1.5mL的(de)50%乙(yi)醇溶液(ye)。放置10分鐘(zhong)。以(yi)(yi)收集(ji)液(ye)第2管為空白，測定(ding)A570波(bo)長的(de)光吸收值，以(yi)(yi)光吸收值為縱坐標(biao)，以(yi)(yi)洗脫(tuo)液(ye)體積為橫坐標(biao)繪制洗脫(tuo)曲(qu)(qu)線。以(yi)(yi)已知3種 氨(an)(an)基酸 的(de)純溶液(ye)樣(yang)品，按上(shang)述方法和條件分別操作，將(jiang)得(de)到(dao)的(de)洗脫(tuo)液(ye)曲(qu)(qu)線與混(hun)合(he) 氨(an)(an)基酸 的(de)洗脫(tuo)曲(qu)(qu)線對(dui)照，可確(que)定(ding)3個峰的(de)大致位(wei)置及(ji)各(ge)峰為何種氨(an)(an)基酸。

WATERS、RESTEK、COSMOSIL、YMC、SIMON等色譜柱和色譜填料、固相萃取柱、氘燈等 
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